课程代码：BB035337 学时：36 学分： 2
适用专业：生物技术 课程性质：必修
执笔人：刘学春 审定人：朱常香
一、实验课的性质与任务
《细胞工程综合实验》是依据专业骨干课程《细胞工程》而设置的综合性设计性实验教学课程，为生物技术本科专业学生必修的专业课程，课程的主要内容包括了细胞工程的基本实验操作技术和实验操作技能，有玻璃仪器的洗涤技术、药品的制备技术、各种灭菌技术、无菌操作技术、植物细胞培养的基本技术、植物组织与器官培养的基本技术、种质资源保存技术、微生物细胞工程技术、动物细胞工程技术，以及相应的生产应用技术，如植物脱毒技术、单倍体的生产技术、三倍体的生产技术、人工种子及生产技术等。与原教学大纲相比，删掉了陈旧的、与其它学科重复而又不影响实验体系完整性的内容，避免与其它学科内容重复，提高实验教学的质量与效益。新增了综合性、设计性专业大实验，新增了跨学科、跨专业、跨课程的交叉性实验，以便在有限的教学时间内尽可能多地传授给学生有关遗传方面的理论知识。
二、实验目的与要求
通过实验教学，使学生系统掌握细胞生物学与组织培养学方面的基本实验内容的原理和操作技术，以加深对理论知识的理解，使学生系统掌握相关仪器设备的日常操作技术和维护技术，掌握如玻璃仪器的洗染等实验室常规操作技术。通过基本操作类实验教学，使学生全面掌握细胞生物学与组织培养方面的常规实验操作技术，培养学生吃苦耐劳、精益求精的务实工作作风，锻炼和提高基本动手能力，要求每一个学生都应认真对待，在完成一定量的工作任务的基础，提高其基础实验操作能力。通过综合型设计型实验的教学，使学生将以前学过的理论知识和基本实验能力加以综合运用，进行有效的有机组合，协同解决实验中出现的问题，并在此基础上，让学生在教师的指导下，自主参与实验设计，并独立地完成实验，以此培养学生的综合实验能力、实验设计能力和创新能力。要求学生在完成基础性实验的基础上，在教师的指导下独立或组成实验小组共同完成，并在实验项目完成后要写出总结。
三、实验项目及内容提要
| 细胞工程综合实验（课程代码：BB035037） |
| 序号 | 实验名称 | 学时 | 必开 | 选开 | 实 验 类 型 | 内容提要 |
| 验 证 | 基本 操作 | 综 合 | 设 计 |
| 1 | 植物叶绿体的制备 | 4 | √ | | | | √ | √ | 叶绿体的提取，光镜的使用与观察。 |
| 2 | 植物原生质体的制备 | 4 | √ | | | | √ | √ | 植物原生质体的制备，光镜的使用与观察。 |
| 3 | 大蒜生长点的无菌接种 | 4 | √ | | | | √ | √ | 超净工作台等的使用，生长点无菌接种操作。 |
| 4 | 母液的制备 | 4 | √ | | | √ | | | 母液及其他药品的制备 |
| 5 | MS培养基的制备 | 4 | √ | | | | √ | √ | MS培养基的制备，高压蒸汽灭菌锅的使用。 |
| 6 | 愈伤组织诱导培养 | 4 | √ | | | | √ | √ | 外植体无菌接种，愈伤组织诱导培养与观察。 |
| 7 | 芽的诱导培养 | 4 | √ | | | | √ | √ | 芽的诱导培养与观察。 |
| 8 | 根的诱导培养 | 4 | √ | | | | √ | √ | 根的诱导培养与观察。 |
| 9 | 组织培养苗的移栽 | 4 | √ | | | | √ | √ | 组织苗的移栽与管理。 |
| 10 | 植物细胞悬浮培养 | 18 | | √ | | | √ | √ | 植物细胞悬浮培养。 |
| 11 | 植物原生质体培养 | 18 | | √ | | | √ | √ | 植物原生质体培养。 |
| 12 | 植物体细胞杂交 | 18 | | √ | | | √ | √ | 植物体细胞杂交。 |
| 13 | 植物脱毒与快繁技术 | 27 | | √ | | | √ | √ | 植物茎尖培养脱毒快繁技术，病毒的检测技术。 |
| 14 | 植物种质材料超低温保存技术 | 27 | | √ | | | √ | √ | 植物种质材料超低温保存、仪器设备的操作。 |
| 15 | 植物花药花粉培养技术 | 27 | | √ | | | √ | √ | 植物花药花粉培养技术 |
| 16 | 植物离体授粉技术 | 27 | | √ | | | √ | √ | 植物离体授粉操作。 |
四、实验报告的格式
实验报告的撰写要求使用专用实验报告纸。实验报告的内容应包括：实验目的、实验的基本原理、实验用的仪器设备及试剂、实验操作程序、实验结果与分析、实验应注意事项及问题讨论。
五、本课程考核方式、方法及实验成绩评定方法
课程成绩有闭卷考试成绩（50%）和实验成绩（50%）两部分组成。实验成绩着重考核学生的实验纪律与态度（25%）、实验技能（25%）、实验结果（25%）、实验报告的质量（25%）四个方面。
六、实验应配套的主要仪器设备及台（套）数
| 仪器设备名称 | 应配置的数量 |
| 漩涡混合仪（WH—2） | 18 |
| 漩涡混合仪（WH—3） | 18 |
| 恒温光照培养箱 | 8 |
| 全温振荡培养箱 | 8 |
| 电动磁力搅拌器 | 12 |
| pH计 | 6 |
| 电冰箱 | 8 |
| 超低温冰柜 | 2 |
| 生化培养箱（HPS-160） | 6 |
| 万分之一电子天平 | 6 |
| 百分之一电子天平 | 6 |
| 台式高速离心机 | 12 |
| 倒置显微镜 | 6 |
| 超净工作台 | 12 |
| 光学显微镜 | 36 |
| 实体解剖镜 | 36 |
| 移液枪 | 12套 |
| 电动玻璃匀浆机 | 12 |
| 药品冷藏保存箱 | 6 |
| 超声波清洗器 | 6 |
| 细胞融合仪 | 18 |
| 微波炉（海尔） | 6 |
| 高压蒸汽灭菌锅 | 12 |
| 实验室超纯水系统 | 1 |
| 电子天平（FA2004A）200g/0.1mg | 6 |
| 电子天平（FA2004A）500g/0.1mg | 6 |
| 电动磁力搅拌器（JBC-2） | 12 |
| 组织培养架 | 6个 |
| 空调设备 | 6套 |
| 家具：药品橱、实验台、实验架、实验凳、光学显微镜柜等。 | 6套 |
| 玻璃仪器及塑料制品：培养皿、烧杯、移液管、滴管、量筒、三角瓶、试剂瓶、培养瓶等 | 36套/班×班数 |
| 温室 | 60㎡ |
附：教学参考书目
[1]《细胞工程》，刘学春等主编，2008年
[2]《细胞培养工程》，陈因良等，华东化工学院出版社，1992
[3]《植物细胞工程实验技术》，孙敬之等，科学出版社，1995
[4]《农作物组织培养》，颜昌敬主编，上海科学技术出版社，1991
[5]《高等植物组织离体培养的形态建成及其调控》，黄学林等，科学出版社，1995
