课程代码：BB034313 学时：72 学分：4
适用专业：生物工程 课程性质：必修
执笔人：周波 审定人：丁延芹
一、实验课的性质与任务
《微生物学实验技术》是生物学重要的基础课之一。特别是随着分子生物学的发展与拓宽，微生物学方法与技术显得尤为重要，熟悉掌握微生物学方法与技术，对其它很多学科的发展有直接的影响。无菌操作技能和无菌概念的建立是微生物学实验中最重要的内容。本课程任务的是强化学生的微生物学实验技术基本操作和技能的训练，并在此基础上进行综合性、系统性的实验和创新技能培训，为进一步的学习和研究奠定坚实的基础，同时也使他们初步掌握先进的技术和方法，与迅速发展的微生物学学科前沿接轨。
二、实验目的与要求
微生物学实验目的是通过实验巩固理论基础知识，培养动手操作能力，提高专业水平。使学生掌握研究与应用微生物的主要方法与技术，具有从事基础理论研究与实际生产应用的微生物学实验技能。本课程在微生物学实验技术A1的基础上，更加强调综合能力与创新意识，提高分析问题和解决问题的能力。
要求：
1、 注重微生物学基础实验技能的掌握与提高，克服盲目追求新颖而忽视基础的倾向；
2、 实验课前要预习，明确每次实验的目的与基本步骤；
3、 在实验中要有严紧的科学态度，尊重事实与实验结果，要善于发现新现象；
4、 树立密切合作的风气，包括学生与老师、班与班、组与组、组长与组员之间的密配合。
5、 根据所学知识和技能，能够自行设计微生物实验。
三、实验项目及内容提要
| 微生物学实验技术A2 |
| 序号 | 实验名称 | 学时 | 必开 | 选开 | 实验类型 | 内容提要 |
| 验证 | 基本操作 | 综合 | 设计 |
| 1 | 牛乳中细菌的检测 | 9 | √ | | | | √ | | 了解牛乳的细菌学检查方法和原理，掌握牛乳的巴斯德消毒法 |
| 2 | 常见细菌的鉴定 | 9 | √ | | | | | √ | 了解微生物代谢类型的多样性，学习利用微生物形态、结构以及生化反应等特征，进行初步分类鉴定。 |
| 3 | 微生物生长曲线测定及丝状真菌生长速率测定 | 12 | √ | | | | | √ | 了解细菌生长曲线的特点及测定的原理，学习用比浊法测定大肠杆菌的生长曲线。比较丝状真菌生长速率与细菌生长曲线的不同。 |
| 4 | 梯度平板法进行抗药性突变株的分离 | 9 | √ | | | | | √ | 学习并掌握利用梯度平板法筛选抗药性菌株的技术 |
| 5 | 噬菌体的分离纯化及效价测定 | 12 | √ | | | | | √ | 学习并掌握噬菌体的分离、纯化以及效价测定的方法。 |
| 6 | 细菌的接合作用 | 9 | √ | | √ | | | | 了解细菌接合导致遗传重组的基本原理，学习细菌接合实验的方法 |
| 7 | 微生物菌种保藏技术 | 12 | √ | | | | √ | | 了解四大类微生物常用菌种保藏技术的原理和方法。 |
四、实验报告的格式
实验完毕，应用专门的实验报告纸，根据预习和实验中的现象及数据记录等，及时而认真地写出实验报告。微生物学实验报告一般包括以下内容：
实验（编号） 实验名称
（一）实验目的
（二）实验原理
（三）主要试剂和仪器 列出实验中所要使用的主要试剂和仪器。
（四）实验步骤 应简明扼要地写出实验步骤流程。
（五）实验数据及其处理 应用文字、表格、图形、将数据表示出来。根据实验要求及计算公式计算出分析结果并进行有关数据和误差处理，尽可能地使记录表格化。
（六）问题讨论 包括实验教材上的思考题和对实验中的现象、产生的误差等进行讨论和分析，尽可能地结合分析化学中有关理论，以提高自己的分析问题、解决问题的能力，也为以后的科学研究打下一定的基础。
五、本课程考核方式、方法及实验成绩评定方法
本课程总分100分。其中平时实验操作50%，平时测验30％，实验报告占20％。
六、实验应配套的主要仪器设备及台（套）数（以一个实验教学班为标准）
| 序号 | 主要设备 | 数目 | 备注 |
| 1 | 超净工作台 | 8（台） | |
| 2 | 冰箱 | 2（台） | |
| 3 | 生化培养箱 | 3（台） | |
| 4 | 微波炉 | 2（台） | |
| 5 | 电磁炉 | 2（台） | |
| 6 | 高压灭菌锅 | 2（台） | |
| 7 | 电子天平 | 2（台） | 精度为0.01g |
| 8 | 烘箱 | 1（台） | |
| 9 | 微量加样器 | 8（套） | 1000ul，100ul两种规格 |
| 10 | 真空泵 | | |
| 11 | 高速离心机 | 2（台） | |
| 12 | 冷冻干燥机 | 1（台） | |
| 13 | 分光光度计 | 2（台） | 722型 |
| 14 | 恒温气浴摇床 | 2（台） | |
| 15 | 恒温水浴锅 | 2（台） | |
| 16 | 干燥器 | 1（台） | |
| 17 | 超低温冰箱 | 1（台） | |
附：教学参考书目
建议使用教材：《微生物学实验》第四版，沈萍、陈向东主编，高等教育出版社，2007年。
主要参考书：
1、《微生物学实验教程》第二版，周德庆主编，高等教育出版社，2006年。
2、《微生物学实验教程》第二版，钱存柔主编，北京大学出版社，2008年。
3、《微生物学实验》，杜秉海主编，北京农业大学出版社，1994年。
4、《食品微生物学实验技术》牛天贵主编，中国农业大学出版社，2002。
