使用说明：

在第一次操作本设备之前请仔细阅读本操作说明书；

设备必须可靠接地；

湿度仪最高使用温度不大于80℃，防水浸；

发酵开始前准备工作（设定为发酵条件，进行DO电极斜率标定、pH电极零点标定）；

发酵结束数据存盘；

关闭总电源前，请将控制器返回主菜单，然后按Ctrl+F6关闭控制程序，然后关电源。

设备运行结束，勿忘关闭自来水阀、空气源、蒸汽发生器。

开始控温前，必须先打开注水开关，直至排水口无气泡为止。

最高工作压力不大于0.20Mp，进罐空气压力应不大于0.20Mp！最高消毒温度126 ℃；

公用工程要求：蒸汽：0.2-0.4Mpa; 水源：0.1-0.3Mpa

一、技术指标

1.1 概述

具有温度、转速、空气流量、湿度显示和控制功能。

1.2指标

1.2.1 温度：自动控制范围：冷却水温+5-50 ℃（±0.2 ℃)；显示范围：0-150 ℃

1.2.2 搅拌转速：变频调速范围0-30（ ±5)rpm，时间比例控制正反转

1.2.3 空气流量：显示控制范围0-50L/min

1.2.4 湿度控制：50-100%

1.2.5 罐体总体积50L，设计压力3.0kg/c㎡，最高工作压力1.5kg/c ㎡，设计工作温度131 ℃

1.2.6 灭菌方法：手动控制蒸汽消毒灭菌

1.2.7 主机功率：3KW（最大），单相220 V

1.2.8气源要求：2~4kg/c ㎡

1.2.9蒸汽要求： 2~4kg/c ㎡

二、管路说明

该流程图中空气管路阀门标号为“AXX”，蒸汽管路阀门标号为“SXX”，冷却水管路阀门标号为“WXX”，冷凝水管路阀门标号为“VXX”，电磁阀标号为“CXX”，物料管路阀门标号为“PXX”，冷冻水管路标号为“CWX”，其它气体管路标号为“NXX”。

2.1 空气及其净化

来自空压机的压缩空气经净化器（外接减压稳压器、除水、除尘、空气予过滤器）进入发酵罐空气总管，空气阀A01、空气流量计、阀A02、空气过滤器，阀A03到达加湿器内或经电磁阀C02进入发酵罐底部分布器，尾气经阀VT1排出，本管路具有计量、净化作用。注：空气流量显示的流量是以过滤器前的压力下的流量，不是标准状态下的流量。如须测量控制湿度则开VT11关VT1。

2.2 蒸汽

2.2.1 蒸汽进夹套

蒸汽经阀S01进夹套（上进），经阀V01排出冷凝水。蒸汽对培养基预热。（固体物料传热效率低，可以取消本步操作）

2.2.2 蒸汽进反应器

蒸汽经阀A02、空气过滤器、阀A03、电磁阀C02进入罐内，由排气口空气阀VT1排出。蒸汽对过滤器及空气管线消毒

2.3 自来水

2.3.1 自来水进夹套

当电磁阀大开时，自来水经多功能阀、阀W01进入反应器夹套（下进），由夹套上口、电磁阀C01排出；当电磁阀关闭时，夹套水经W02进入电热器、循环泵、单相阀进入夹套（下口），通过夹套水的循环，将加热器的热能带入夹套，通过夹套的换热加热发酵液。特别提示：温度自动前必须对夹套注水。

2.3.2 自来水进排气冷凝器

自来水经阀W03进入排气冷凝器，对发酵尾气进行冷却尽可能减少培养基的水分蒸发

2.4 冷冻水 （选配）（消毒后降温应优先采用自来水）

冷冻水经切换阀T02（关T01）进入自来水管线、经切换阀T04（关T03）返回了冷冻水回路。

2.8 纯氧管线（选配）

纯氧管线：纯氧进入流量计、电磁阀C03、切断阀A21进入空气过滤器。纯氧流量调节：开C03、A21后调节流量计的调节手柄。

2.9空气流量检测与控制：

空气热质量流量计：与空气玻璃转子流量计并联安装且在热质量流量计前后安装切断阀。热质量流量计内通道必须保持干燥无尘，因此只有在发酵过程中才开质量流量计的前后切断阀A11、A12，发酵结束后应及时关闭A11、A12。

2.10 补氨水管线

氨水经电磁阀C04、切断阀A31、补料针进入发酵罐，电磁阀由控制器控制

三、实罐灭菌操作

3.1 准备

3.1.1盖紧罐盖上各种盖帽，旋紧罐盖上压紧螺栓。

3.2培养基预热

3.2.1准备工作

预先启动蒸汽发生器及空气压缩机

将控制器中的温度控制设定为手动

开排气阀VT1，关闭其它阀门

湿度仪不耐高温和不可水浸，消毒后必须关闭排气旁通阀VT11。

3.2.2开排气阀VT1，开夹套冷凝水阀V01排夹套水，关闭其它阀门。

3.2.3启动反应器搅拌马达。调转速20~30Rpm

3.2.4 蒸汽进夹套（固体物料可以取消本操作）缓缓开夹套蒸汽阀S01蒸汽夹套（注意：此时有轻微爆炸声属正常，如声音过响，则开阀的速度应减慢）。待排水总口排出蒸汽时调节冷凝水阀V01，控制蒸汽排出量以有少量蒸气冒出即可。并控制夹套内压力不超过0.2Mpa。当培养基预热至98 ℃时，进入实罐灭菌操作。在培养基温度在80~90 ℃时可以适当的减慢升温速度，在本温度的区域内可以杀死大部分的微生物。

3.3实罐灭菌

3.3.1蒸汽进过滤器：微开过滤器上排冷凝水阀V02，开过滤器前蒸汽阀S02，微加湿器底阀排冷凝水阀V03，缓缓开切断阀A03，蒸汽经过滤器进入反应器，同时在控制器F5“空气”子画面中设定控制方式为“手动”并按F3输入“-100”后按“ENTER”，电磁阀C02在消毒过程中始终是开着的，以保正空气管线消毒彻底。当冷凝水阀V02、V03出口冷凝水很少时，调节冷凝水阀V02、V03以有少量蒸汽排出为宜。当排气口有蒸汽排出或罐温达到100 ℃两分钟后，关闭排气阀VT1。调节切断阀A03和蒸汽阀S02，维持过滤器前蒸汽压力为0.12~0.16Mpa，同时必须保证切断阀有一定开度，不得关死。

3.3.2 当达到预定温度或罐压，开排气阀VT1至有少量蒸气排出，关紧或微开夹套蒸汽阀S01，根据罐压或温度的变化趋势，及时调节蒸汽阀S02、S03。阀门调节宜微调应避免大幅度开关。当反应罐罐压或罐温维持在预定的范围内开始计时。

3.3.3 （略）

3.3.4 保温阶段应旋松接种口盖至有少量蒸气冒出

3.3.5 移种管线消毒（适用于多级发酵）

在保温过程中开移种管线阀P03及受种阀前排水阀V04，保温结束前关闭V03。

3.4灭菌完成及降温（先开后关，后开先关）

3.4.1 保温结束首先旋紧接种口盖。

3.4.2关紧冷凝水阀V03，关紧过滤器前蒸汽阀，全开空气阀A01、A02，用空气吹过滤器，当过滤器冷凝水阀V02排尽冷凝水后就可以关闭。

3.4.3 关夹套蒸汽阀S01、冷凝水阀V01，开夹套进水阀W01和循环管线切断阀W02。在控制器中将温度控制方式设定为“自动”并对温度进行设定，发酵罐进行自动降温。按下搅拌开关，设定搅拌转速并“自动”控制。

3.4.5 在降温过程中，始终监视罐压，严禁压力掉零。当温度达到工艺要求时，调节搅拌转速、空气流量、罐压、标定溶氧电极斜率及校正pH电极的零点。

注意：1.如另配冷冻水系统消毒后降温请选用自来水降温（控制箱左侧板N2开关拨向“W”）2. 消毒过程中不得开湿度仪前切断阀VT11。湿度仪最好使用温度为80 ℃

四、发酵操作

4.1 准备

4.2 接种

4.2.1 摇瓶倒种：调节进气量至0.2VVM，开排气阀VT1至罐压接近零（不得大于0.02Mpa），予先旋松接种口，在接种口处放好火焰圈并点燃（在火焰圈中放置少量的棉花可以助燃提高火焰的高度），打开接种口，倒入种子，然后旋紧接种盖，立即调高罐压。

4.2.3 发酵初始化：在控制器的发酵罐状态画面输入“发酵批号”，再按“就绪”或“开始”并“确认”，发酵数据才能自动保存。设定发酵过程参数及适宜的控制模式

4.3 湿度控制

4.3.1 关阀A03，将经灭菌消毒的补水瓶及输液管放置底座上，用硅胶管将补水瓶上的呼吸过滤器与空气精过滤器阀V02连通。

4.3.2 旋下加湿器补料口上闷头，用酒精棉球对补料口内橡胶塞外表面消毒，然后将针头插入并穿透密封盖，并用补料针上的螺母锁紧。

4.3.3 开输液管上的弹簧夹，缓缓开阀V02 将无菌水压入加湿器内。关阀V02 ，拔出针头，盖紧补料口上闷头。

4.3.4 湿度控制：在控制器空气子画面上设定：F1：空气50~100（（说明：这里的“空气”实际上是“湿度”，单位L/min应为%），F2：控制方式为“自动”。开阀A03。当湿度低于设定值时电磁阀自动关闭，空气进入加湿器。当湿度高于设定值时，电磁阀自动打开，大量空气经过电磁阀直接进入发酵罐。

4.3.5 开排气阀VT11，关VT01

4.4 取样

4.4.1 取样器：开罐盖N9口上闷头，将取样管垂直于管盖插入罐内（建议取样时关闭搅拌），抽出取样管，盖紧上闷头。

4.5 发酵开始前设定发酵参数（详见第五章)

4.6 放料 放料是通过开罐盖放料

4.7 发酵结束

发酵结束必须在控制器在控制器的发酵罐状态画面按“正在发酵”并“确认”，如果需要发酵数据归档请按“可以归档”并确认。发酵数据将自动整理并保存。发酵结束后应关紧VT11

4.8 搅拌正反转设定

在时间比例控制器拨动数字盘设定正转时间、反转时间，拨动数字盘上端的时间单位;M-分钟。S-秒。设定完成后开时间比例控制器右侧的控制开关（向右开，向左关），任何一次设定后必须重新开关“控制开关”。